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人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè) 定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng) 而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行 定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
   然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
操作步驟: 
1. 準(zhǔn)備試劑:ELISA 試劑盒中包含以下組分:已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)、酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)、酶的底物、陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中)、參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中)、結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液、洗滌液和酶反應(yīng)終止液。
2. 包被:用包被緩沖液將抗原或抗體稀釋至適當(dāng)濃度,然后在每個(gè)聚苯板的反應(yīng)孔中加入 0.1ml,4℃過(guò)夜。
3. 洗滌:棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液清洗反應(yīng)孔,重復(fù) 3 次,每次 3 分鐘。
4. 加樣:將待檢樣品和陰性對(duì)照品、陽(yáng)性對(duì)照品按一定稀釋度加入已包被的反應(yīng)孔中,37℃孵育 1 小時(shí)。
5. 洗滌:再次清洗反應(yīng)孔。
6. 加酶標(biāo)記物:將酶標(biāo)記的抗原或抗體加入反應(yīng)孔中,37℃孵育 1 小時(shí)。
7. 洗滌:清洗反應(yīng)孔。
8. 加底物:每個(gè)反應(yīng)孔中加入適量的酶底物,37℃孵育 10-30 分鐘。
9. 終止反應(yīng):加入終止液,終止酶促反應(yīng)。
10. 讀數(shù):用酶標(biāo)儀檢測(cè)各反應(yīng)孔的吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品的濃度。
通過(guò)上述步驟,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)特定抗原或抗體的高靈敏度檢測(cè)。 
人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng):
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。 
人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒性能
1. 靈敏度:的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。 
常見(jiàn)祥本處理方法
1、血清:用無(wú)菌管收集,室溫血液自然凝固1020分鐘,2 -8C條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10 20分鐘后,2-8C條件離心20分鐘左右(2000 3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。2 8C條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
4、組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取1g組織,加入9g的pH7. 2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000 3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測(cè),其余冷凍備用,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。對(duì)于植物組織,不好勻漿的話,就在液氮中充分研磨:
5、其他樣本處理方法:請(qǐng)聯(lián)系客服索要
溫馨提醒
1.價(jià)格問(wèn)題:價(jià)格以本公司的實(shí)際報(bào)價(jià)為準(zhǔn);
2.產(chǎn)品問(wèn)題:所有的商品我們公司在發(fā)貨之前都進(jìn)行嚴(yán)格質(zhì)檢,確保無(wú)任何問(wèn)題才發(fā)貨;
3.產(chǎn)品屬性:下單之前或者購(gòu)買之前,要與客服溝通,核對(duì)產(chǎn)品的屬性數(shù)量等信息確保無(wú)誤;
4.訂購(gòu)方法:款到發(fā)貨,如需要請(qǐng)傳資料,具體細(xì)節(jié)請(qǐng)?jiān)斣?
5.運(yùn)輸方式:順豐快遞;
6.質(zhì)優(yōu)價(jià)廉:歡迎訂購(gòu),產(chǎn)品量大價(jià)優(yōu);
7.其它服務(wù):免費(fèi)代測(cè),如果您對(duì)產(chǎn)品服務(wù)及產(chǎn)品質(zhì)量技術(shù)指標(biāo)有特殊要求,請(qǐng)?zhí)崆巴ㄖ曳?
8.服務(wù)宗旨:以客戶為中心,誠(chéng)信雙贏的核心價(jià)值觀,積極夠造良好的客戶關(guān)系和先進(jìn)的服務(wù)理念,為客戶創(chuàng)造價(jià)值,客戶的滿意就是我們的追求
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