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- 品牌:研玘生物
- 產(chǎn)地:上海
- 型號:96T/48T
- 貨號:YQ-66631K
- 價格: ¥782/盒
- 發(fā)布日期: 2024-04-10
- 更新日期: 2025-07-18
產(chǎn)地 | 上海 |
保存條件 | 2-8℃ |
品牌 | 研玘生物 |
貨號 | YQ-66631K |
用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
檢測方法 | 酶聯(lián)免疫法 |
保質(zhì)期 | 6個月 |
適應(yīng)物種 | 人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細(xì)胞,土壤等動植物 |
檢測限 | 詳見說明書 |
數(shù)量 | 99 |
包裝規(guī)格 | 96T/48T |
標(biāo)記物 | HRP標(biāo)記物 |
樣本 | 血清,血漿,唾液,尿液,組織,細(xì)胞上清,裂解液等 |
應(yīng)用 | 定性檢測/定量檢測/酶活檢測 |
是否進(jìn)口 | 否 |
犬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒 YQ-66631K
研玘生物elisa試劑盒原理:免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發(fā)生的高選擇性高特識別和結(jié)合原理,對待測抗體或者抗原進(jìn)行分析測定的方法,酶聯(lián)免疫吸附分析(下稱ELISA)是免疫分析的一種,分三個部分組成:免疫識別,信號輸出和數(shù)據(jù)處理。
步驟:免疫識別是在聚苯制成的96孔板上包被抗體,而后利用抗體識別待測的抗原(通常是的蛋白質(zhì)生物標(biāo)記物,病毒,細(xì)菌等等,從復(fù)雜待測液中將抗原吸附到96孔板表面。接著用帶有辣根化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)、熒光或放射性標(biāo)記的抗體通過直接或者間接的方式輸出識別信號。最-后利用信號強(qiáng)度,標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度梯度等信息計算得出待測樣中目標(biāo)抗原的濃度。
分類:根據(jù)免疫識別和信號輸出方式的不同,ELISA可以分為雙抗體夾心法、直接免疫競爭法和非直接免疫競爭法等等。其中雙抗體夾心法在商業(yè)應(yīng)用上最常見。
犬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒雙抗一步夾心法:
1.抗體包被 在96孔板上包被抗體。由于酶標(biāo)板是由聚苯制成,其含有的苯環(huán)與抗體的酸殘基具有類似π-π堆積作用的引力,結(jié)合靜電和疏水作用,可以將抗體吸附于其表面。然后,將未吸附的抗體用緩沖液清洗后,加入含有明膠或牛血清蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)的封閉液以封閉酶標(biāo)板上未結(jié)合抗體的部分。加入封閉液的目的,是防止其他蛋白因靜電或疏水作用吸附在96孔板上,造成假陽性信號,干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。
2.免疫識別 在96孔板上包被抗體后,加入待測樣,并在37°C環(huán)境下孵育一段時間,通常是1-2小時。此時酶標(biāo)板上的抗體與待測抗原進(jìn)行特識別結(jié)合。此處抗體的質(zhì)量是關(guān)鍵,好的抗體既能特地結(jié)合抗原又不受待測樣中其他生物大分子、蛋白質(zhì)和無機(jī)鹽等成分的影響。
3.洗板 將未結(jié)合的抗原洗掉,加入該抗原所對應(yīng)的識別抗體并在37°C下繼續(xù)培養(yǎng)1-2小時,接著將未連接上抗原的抗體洗掉。
4.酶標(biāo)信號輸出 加入帶有辣根化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)標(biāo)記的酶標(biāo)二抗,用于和標(biāo)準(zhǔn)抗體結(jié)合。在培養(yǎng)30分鐘后洗掉未連接的二抗,并加入顯色劑顯色。根據(jù)顯色的結(jié)果判斷抗原的濃度。一般認(rèn)為,抗原濃度與顯色后的發(fā)光強(qiáng)度呈正相關(guān)。
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